一、導(dǎo)致高基線和變化基線的流動相雜質(zhì)：
? ? ? ? 雜質(zhì)在流動相中高度溶解的特定情況下，它們不會被色譜柱截留，并有助于在整個色譜圖中產(chǎn)生高于正常的檢測器信號。使用梯度洗脫時，如果雜質(zhì)僅存在于梯度中使用的一種溶劑中，則檢測器信號可能會緩慢變化并且與在任何時間點對流動相有貢獻的溶劑比例有關(guān)。
? ? ? ? 流動相雜質(zhì)不會表現(xiàn)為看起來像典型色譜峰的信號特征，因此它們不會直接與分析物峰本身發(fā)生沖突。但是如果雜質(zhì)的物理化學性質(zhì)與分離中的目標分析物相似，則雜質(zhì)可以表現(xiàn)為基線中看起來像典型峰的特征。有時這些被稱為“鬼峰”，因為即使沒有樣品注入，它們也會持續(xù)存在于基線中。
二、檢測器對主要流動相組分的響應(yīng)：
? ? ? ? 有時候用于 LC 方法的溶劑制備中的微小變化會對基線的外觀產(chǎn)生巨大影響。這種效應(yīng)的一個典型例子是從磷酸鹽緩沖流動相變?yōu)槭褂眉姿嶙鳛樘砑觿┑牧鲃酉?。盡管磷酸鹽物質(zhì)對低至約 200 nm 的紫外光具有高度透明性，但羧酸鹽物質(zhì)（如甲酸鹽、乙酸鹽）比約 230 nm 以下的磷酸鹽吸收更多。當使用梯度洗脫時，很容易觀察到這種差異，并且添加劑僅存在于流動相梯度中使用的一種溶劑中（例如，大部分水性溶劑）。
三、由于泵問題導(dǎo)致流動相組成不一致：
? ? ? ? ?粘性止回閥和滯留氣泡是高壓泵頭流量不一致的常見原因，當二元泵系統(tǒng)中的兩個泵中的一個發(fā)生故障時，可能會導(dǎo)致通過 HPLC 色譜柱并最終到達檢測器的流動相成分發(fā)生極端變化。如果使用中的檢測器對這些成分變化很敏感，那么異常檢測器基線可能是真正由泵引起的問題的征兆。一個極端的例子是 A 溶劑含有乙酸銨，B 溶劑是乙腈，并且在 210 nm 處使用 UV 檢測的情況。在這種情況下，A 溶劑比 B 溶劑吸收更多的光，但如果 A/B 混合物的成分隨時間保持一致，則將觀察到平滑、平坦的檢測器基線。但是，如果來自 A 通道的流量由于止回閥問題或氣泡而變得不一致，則 A/B 混合物的成分將不一致，從而導(dǎo)致基線中出現(xiàn)鋸齒狀圖案。
四、溫度影響：
? ? ? ? 不同的檢測器以不同的方式受到溫度變化的影響。眾所周知，折射率 (RI) 檢測的信號基線對溫度變化非常敏感。因此，穩(wěn)定檢測器本身和實驗室環(huán)境的溫度將有助于最大限度地減少基線漂移。UV 吸光度檢測器也容易發(fā)生溫度變化，這會導(dǎo)致基線漂移，但與 RI 檢測器相比，變化程度較小。與過去的舊設(shè)計相比，現(xiàn)代紫外線檢測器設(shè)計對實驗室溫度變化的影響要小得多。
? ? ? ? 面對色譜系統(tǒng)中的流動相存在雜質(zhì)的情況，恒譜生可以為您解決這些問題，恒譜生流動相過濾頭具有以下這些特性:
(1）性能穩(wěn)定，抗沖擊和交變負載能力優(yōu)于其他金屬過濾材料;
(2）孔隙均勻穩(wěn)定，透氣性好，壓力損耗小、過濾精度高、分離效果過濾性能穩(wěn)定;
(3）機械強度優(yōu)異，無須外加骨架支撐保護，安裝和使用簡單，維護方便，組裝性好。
(4)易于反吹、可清洗、再生能力強，反復(fù)清洗再生后過濾性能恢復(fù)90%以上，使用壽命長、材料利用率高。
? ? ? ?恒譜生鬼峰捕集去除柱可以有效吸附流動相中的雜志，從而縮短了方法驗證和雜質(zhì)分析的時間。鬼峰捕集去除柱主要的特點是能夠去除溶劑包括有機溶劑中的雜質(zhì)，在反相色譜梯度分析時，將小柱安裝在梯度混合器和自動進樣器之間，不僅能夠去除流動相中的雜質(zhì)，還可以有效捕集管路和混合器中的雜質(zhì)。
? ? ? ? 今天恒譜生分享的知識先到這啦，希望對您的工作有所幫助！
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發(fā)布于: 2022-09-09